RINGKASAN DAN PENJELASAN TES
Malaria adalah penyakit yang ditularkan oleh nyamuk, hemolitik, demam yang menginfeksi lebih dari 200 juta orang dan membunuh lebih dari 1 juta orang per tahun.Penyakit ini disebabkan oleh empat spesies Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale, dan P. malariae.Semua plasmodia ini menginfeksi dan menghancurkan eritrosit manusia, menyebabkan menggigil, demam, anemia, dan splenomegali.P. falciparum menyebabkan penyakit yang lebih parah daripada spesies plasmodial lainnya dan menyebabkan sebagian besar kematian akibat malaria.P. falciparum dan P. vivax adalah patogen yang paling umum, namun terdapat variasi geografis yang cukup besar dalam distribusi spesies.
Secara tradisional, malaria didiagnosis dengan demonstrasi organisme pada apusan darah tepi yang kental dengan pewarnaan Giemsa, dan spesies plasmodium yang berbeda dibedakan dengan penampilan mereka dalam eritrosit yang terinfeksi1.Teknik ini mampu memberikan diagnosis yang akurat dan andal, tetapi hanya jika dilakukan oleh ahli mikroskop yang terampil menggunakan protokol yang ditentukan2, yang menimbulkan hambatan besar bagi daerah terpencil dan miskin di dunia.
Kit Tes Cepat Antigen Malaria Pf / Pan dikembangkan untuk mengatasi kendala tersebut.Uji ini menggunakan sepasang antibodi monoklonal dan poliklonal terhadap protein spesifik P. falciparum, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II), dan sepasang antibodi monoklonal terhadap plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH), sebuah protein yang diproduksi oleh empat spesies plasmodium, sehingga memungkinkan deteksi dan pembedaan infeksi secara bersamaan dengan P. falciparum dan atau salah satu dari tiga plasmodia lainnya.Ini dapat dilakukan oleh personel yang tidak terlatih atau berketerampilan minimal, tanpa peralatan laboratorium.
PRINSIP
Kit Tes Cepat Pf/ Pan Malaria adalah immunoassay kromatografi aliran lateral.Komponen strip tes terdiri dari: 1) pad konjugat berwarna burgundy yang mengandung antibodi anti-pHRP-II tikus yang terkonjugasi dengan emas koloid (konjugat emas-pHRP II) dan antibodi anti-pLDH tikus yang terkonjugasi dengan emas koloid (konjugat pLDH-emas),
2) strip membran nitroselulosa yang berisi dua pita uji (pita Pan dan Pv) dan pita kontrol (pita C).Pan band dilapisi dengan antibodi anti-pLDH monoklonal dimana infeksi dengan salah satu dari empat spesies plasmodia dapat dideteksi, pita Pf dilapisi dengan antibodi anti-pHRP-II poliklonal untuk mendeteksi infeksi Pf, dan pita C dilapisi dengan IgG anti-tikus kambing.
Selama pengujian, volume yang cukup dari spesimen darah disalurkan ke dalam sumur sampel (S) dari kaset uji, buffer lisis ditambahkan ke sumur buffer (B).Buffer mengandung deterjen yang melisiskan sel darah merah dan melepaskan berbagai antigen plasmodium, yang bermigrasi dengan aksi kapiler melintasi strip yang dipegang dalam kaset.pHRP-II jika ada dalam spesimen akan berikatan dengan konjugat pHRP II-emas.Imunokompleks kemudian ditangkap pada membran oleh antibodi anti-pHRPII yang telah dilapisi sebelumnya, membentuk pita Pf berwarna merah anggur, yang menunjukkan hasil tes positif Pf.pLDH jika ada dalam spesimen akan berikatan dengan konjugat emas pLDH.Imunokompleks kemudian ditangkap pada membran oleh antibodi anti pLDH yang telah dilapisi sebelumnya, membentuk pita Pan berwarna merah anggur, yang menunjukkan hasil tes positif plasmodium.Dengan tidak adanya Pan band, hasil tes positif untuk salah satu dari tiga plasmodia lainnya dapat direkomendasikan.
Tidak adanya pita uji (Pan dan Pf) menunjukkan hasil negatif.Tes berisi kontrol internal (C band) yang harus menunjukkan pita berwarna merah anggur dari immunocomplex IgG anti-tikus kambing / IgG tikus (konjugat pHRP-II dan pLDH-emas) terlepas dari perkembangan warna pada pita uji mana pun.Jika tidak, hasil tes tidak valid dan spesimen harus diuji ulang dengan alat lain.
