RINGKASAN DAN PENJELASAN TES
Malaria adalah penyakit yang ditularkan oleh nyamuk, hemolitik, demam yang menginfeksi lebih dari 200 juta orang dan membunuh lebih dari 1 juta orang per tahun.Penyakit ini disebabkan oleh empat spesies Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale, dan P. malariae.Semua plasmodia ini menginfeksi dan menghancurkan eritrosit manusia, menyebabkan menggigil, demam, anemia, dan splenomegali.P. falciparum menyebabkan penyakit yang lebih parah daripada spesies plasmodial lainnya dan menyebabkan sebagian besar kematian akibat malaria.P. falciparum dan P. vivax adalah patogen yang paling umum, namun terdapat variasi geografis yang cukup besar dalam distribusi spesies.
Secara tradisional, malaria didiagnosis dengan demonstrasi organisme pada apusan darah tepi yang tebal dan bernoda Giemsa, dan spesies plasmodium yang berbeda dibedakan dengan penampilan mereka dalam eritrosit yang terinfeksi.Teknik ini mampu memberikan diagnosis yang akurat dan andal, tetapi hanya jika dilakukan oleh ahli mikroskop yang terampil menggunakan protokol yang ditentukan, yang menimbulkan hambatan besar bagi daerah terpencil dan miskin di dunia.
Tes Cepat Malaria Pf/Pv Ag dikembangkan untuk mengatasi hambatan ini.Ini menggunakan antibodi spesifik untuk P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) dan P. vivax Lactate Dehydrogenase (Pv-LDH) untuk secara bersamaan mendeteksi dan membedakan infeksi P. falciparum dan P. vivax.Tes dapat dilakukan oleh tenaga terlatih atau minimal terampil, tanpa peralatan laboratorium
PRINSIP
Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test adalah immunoassay kromatografi aliran lateral.Komponen uji strip terdiri dari: 1) bantalan konjugat berwarna burgundy yang mengandung antibodi anti-Pv-LDH tikus yang terkonjugasi dengan emas koloid (konjugat Pv-LDH-emas) dan antibodi anti-pHRP-II tikus yang terkonjugasi dengan emas koloid (konjugat emas-pHRP-II), 2) strip membran nitroselulosa yang berisi dua pita uji (pita Pv dan Pf) dan pita kontrol (pita C).Pita Pv dilapisi dengan antibodi spesifik anti-Pv-LDH tikus lain untuk mendeteksi infeksi Pv, pita Pf dilapisi dengan antibodi anti-pHRP-II poliklonal untuk mendeteksi infeksi Pf, dan pita C dilapisi dengan IgG anti-tikus kambing.
Selama pengujian, volume yang cukup dari spesimen darah disalurkan ke dalam sumur sampel (S) dari kaset uji, buffer lisis ditambahkan ke sumur buffer (B).Buffer mengandung deterjen yang melisiskan sel darah merah dan melepaskan berbagai antigen, yang bermigrasi dengan aksi kapiler melintasi strip yang disimpan dalam kaset.Pv-LDH jika ada dalam spesimen akan berikatan dengan konjugat Pv-LDH-emas.Imunokompleks kemudian ditangkap pada membran oleh antibodi anti-Pv-LDH yang telah dilapisi sebelumnya, membentuk pita Pv berwarna merah anggur, yang menunjukkan hasil tes positif Pv.Sebagai alternatif, pHRP-II jika ada dalam spesimen akan berikatan dengan konjugat pHRP-II-emas.Imunokompleks kemudian ditangkap pada membran oleh antibodi anti-pHRP-II yang telah dilapisi sebelumnya, membentuk pita Pf berwarna merah anggur, yang menunjukkan hasil tes positif Pf.Tidak adanya pita uji menunjukkan hasil negatif.Tes berisi kontrol internal (pita C) yang harus menunjukkan pita berwarna merah anggur dari imunokompleks IgG anti-tikus kambing / IgG tikus (anti-Pv-LDH dan anti-pHRPII)-emas terlepas dari perkembangan warna pada salah satu pita uji.Jika tidak, hasil tes tidak valid dan spesimen harus diuji ulang dengan alat lain.
